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qPCR實(shí)驗(yàn):0.1 ml PCR 12聯(lián)管配熒光定量光學(xué)平蓋
更新時(shí)間:2025-09-10瀏覽:109次

  qPCR實(shí)驗(yàn):0.1 ml PCR 12聯(lián)管配熒光定量光學(xué)平蓋

  這是一種專(zhuān)為實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的關(guān)鍵耗材,其核心目的是在qPCR儀中進(jìn)行熒光信號(hào)采集時(shí),實(shí)現(xiàn)高通量、低成本且可靠的檢測(cè)。

  以下是詳細(xì)的介紹:

  一、是什么?

  這是一種通常由高透光的聚丙烯(PP)或聚酯薄膜制成的薄片狀蓋膜。它的一面涂有特殊的光學(xué)透明膠,另一面是超平滑的光學(xué)表面。

  匹配性:它專(zhuān)為12聯(lián)管(也稱(chēng)為12排管) 設(shè)計(jì),尺寸匹配標(biāo)準(zhǔn)96孔板規(guī)格(SBS標(biāo)準(zhǔn))的12聯(lián)管架子。

  功能:通過(guò)壓敏膠,將其緊密地粘貼在12聯(lián)管的管口上,形成一個(gè)光學(xué)平整的密封表面,并防止PCR過(guò)程中試劑的蒸發(fā)和交叉污染。

  二、主要特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)

  優(yōu)異的光學(xué)透性:

  蓋膜具有的透光率,特別是在qPCR常用的熒光波長(zhǎng)范圍內(nèi)(如FAM, VIC, ROX, Cy5等),確保熒光信號(hào)能被儀器光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)準(zhǔn)確、高效地捕獲,保證數(shù)據(jù)的精確性。


0.2ml PCR十二聯(lián)管 透明.png


  光學(xué)平整表面:

  “平蓋"意味著其表面非常平整。這在qPCR中至關(guān)重要,因?yàn)閮x器的光學(xué)鏡頭在掃描時(shí),其焦距是固定的。一個(gè)平整的蓋膜表面確保了每個(gè)孔到鏡頭的距離一致,避免了因高度差導(dǎo)致的信號(hào)聚焦不準(zhǔn)和信號(hào)衰減,從而保證了孔間數(shù)據(jù)的可比性和重復(fù)性。

  密封防蒸發(fā):

  背面的壓敏膠能形成牢固的密封,有效防止PCR過(guò)程中高溫導(dǎo)致的水分蒸發(fā)。試劑蒸發(fā)會(huì)顯著改變反應(yīng)體系的濃度,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗(如Ct值不準(zhǔn)、反應(yīng)效率低下等)。

  高通量與低成本:

  這是其相對(duì)于單個(gè)硬質(zhì)穹頂蓋。使用硬質(zhì)蓋帽需要逐個(gè)手動(dòng)或使用壓蓋器扣蓋,非常耗時(shí)耗力。而光學(xué)平蓋可以一次性密封整排12個(gè)或整個(gè)96孔板,極大地提高了工作效率,特別適合大批量樣本檢測(cè)。

  成本通常遠(yuǎn)低于購(gòu)買(mǎi)96個(gè)獨(dú)立的硬質(zhì)蓋帽。

  防交叉污染:

  良好的密封性也避免了氣溶膠的溢出,防止了孔與孔之間的交叉污染。

  三、適用場(chǎng)景

  高通量熒光定量PCR實(shí)驗(yàn):如基因表達(dá)分析(RT-qPCR)、病原體檢測(cè)、SNP分型等所有需要用到96孔板格式qPCR的實(shí)驗(yàn)。

  使用標(biāo)準(zhǔn)12聯(lián)管(0.1 ml)和96孔板支架的各類(lèi)qPCR儀,例如:

  Applied Biosystems (ABI) 7500/7500 Fast, StepOnePlus, ViiA 7

  QuantStudio 3/5/6/7 Pro

  Bio-Rad CFX96, CFX Opus系列

  Roche LightCycler 480

  Eppendorf Mastercycler ep realplex

  以及其他兼容96孔板的qPCR儀。

  四、如何使用?

  準(zhǔn)備:將反應(yīng)體系加入0.1 ml的12聯(lián)管中,并將聯(lián)管放入對(duì)應(yīng)的96孔板架子上。

  撕?。簭谋Wo(hù)底紙上取下一張光學(xué)平蓋(通常為8聯(lián)排或12聯(lián)排的預(yù)切割蓋膜)。

  覆蓋:將蓋膜有膠的一面朝下,仔細(xì)對(duì)齊管架的上緣,輕輕放下。

  壓緊:使用提供的壓板工具或?qū)嶒?yàn)室常用的平板刮板,用力、均勻地刮壓蓋膜表面,確保每個(gè)管口都與蓋膜密封,沒(méi)有氣泡和褶皺。

  檢測(cè):將密封好的整個(gè)板架放入qPCR儀中進(jìn)行擴(kuò)增和熒光采集。

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  五、選擇注意事項(xiàng)

  兼容性:務(wù)必確認(rèn)光學(xué)平蓋與您實(shí)驗(yàn)室的qPCR儀型號(hào)兼容。不同儀器的光學(xué)系統(tǒng)設(shè)計(jì)可能對(duì)蓋子的透光率和厚度有特定要求。

  粘合劑:優(yōu)質(zhì)的粘合劑應(yīng)能在PCR熱循環(huán)的高溫(通常最高105°C)下保持粘性,不會(huì)熔化、溢出或殘留難以清理的膠漬。

  無(wú)核酸酶/無(wú)酶:確保產(chǎn)品經(jīng)過(guò)認(rèn)證,無(wú)核酸酶和無(wú)DNA/RNA酶污染,這對(duì)于敏感的qPCR實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要。

  無(wú)熒光干擾:蓋膜自身不應(yīng)產(chǎn)生自發(fā)熒光,以免干擾熒光信號(hào)的采集,造成背景值過(guò)高。

  注:以上資料僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),如需具體產(chǎn)品資料請(qǐng)咨詢(xún)技術(shù)老師或品牌商。

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