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人高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/1/15瀏覽:233次
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  ?人高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA試劑盒實驗使用說明書主要包括以下內容?:

  一、實驗原理

  試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)原理。預先包被高遷移率族蛋白1(HMG-1)抗體的微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌后,用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺與樣品中的HMG-1濃度呈正相關。通過酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),可以計算樣品濃度?。

  二、試劑盒組成

  試劑盒通常包括酶標板、酶標抗體工作液、標本稀釋液、濃縮洗滌液、標準品、底物工作液等組件,具體組成可能因不同品牌而有所差異。這些組件需在2-8℃條件下保存?。

  三、樣品收集、處理及保存

  血清:使用不含熱原和內毒素的試管收集血液,離心分離血清和紅細胞,取上清檢測或凍存于-20℃/-80℃?。

  血漿:使用EDTA、檸檬酸鹽或肝素作為抗凝劑,離心取上清檢測或凍存?23。

  其他樣本如細胞上清液、組織勻漿等也需經過適當處理后方可檢測?25。

  四、實驗步驟

  提前從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。

  配制洗滌液,將濃縮洗滌液按一定比例稀釋。

  按照說明書操作,依次加入標本、標準品、檢測抗體等,進行溫育和洗滌。

  加入底物TMB顯色,并在規(guī)定時間內加入終止液。

  使用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),并根據(jù)標準曲線計算樣品濃度?。

  五、注意事項

  試劑盒需保存在2-8℃,使用前需室溫平衡。

  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中密封保存。

  嚴格按照說明書中的時間、加液量及順序進行操作。

  所有液體組分使用前需充分搖勻?。

  六、自備物品

  進行ELISA實驗還需自備一些實驗器材,如酶標儀(450nm)、高精度加樣器及槍頭、37℃恒溫箱等?。

  請嚴格按照本說明書進行操作,以確保實驗結果的準確性。如有任何疑問或問題,請及時聯(lián)系供應商或專業(yè)技術人員進行咨詢。


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