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植物醇溶谷蛋白(ASP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
發(fā)布時間:2025/4/16瀏覽:66次
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  以下是植物醇溶谷蛋白(ASP)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明書,綜合整理自相關(guān)技術(shù)資料:

  BS-4955  植物醇溶谷蛋白(ASP)ELISA試劑盒

  一、實(shí)驗(yàn)原理

  采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。預(yù)先包被ASP捕獲抗體的微孔板中依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品和HRP標(biāo)記檢測抗體,經(jīng)溫育洗滌后,通過TMB顯色反應(yīng)(藍(lán)色→黃色)實(shí)現(xiàn)定量檢測,顏色深淺與ASP濃度呈正相關(guān)?。

  二、樣本處理要求

  血清?

  采集后室溫靜置2小時或4℃過夜,1000×g離心20分鐘取上清

  避免反復(fù)凍融,建議-20℃/-80℃保存?

  血漿?

  需使用EDTA/肝素抗凝劑,采集后30分鐘內(nèi)2-8℃ 1000×g離心15分鐘?

  組織勻漿?

  建議使用預(yù)冷PBS(pH7.4)制備勻漿液?

  三、操作步驟

  將試劑平衡至室溫(約30分鐘)?

  分別加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本至對應(yīng)微孔(建議做復(fù)孔)?

  加入HRP標(biāo)記抗體,37℃溫育60分鐘?

  洗板5次(每次靜置30秒棄液)?

  每孔加入TMB顯色液,避光反應(yīng)15分鐘?

  加入終止液,15分鐘內(nèi)450nm波長測OD值?

  四、注意事項(xiàng)

  保存條件?:試劑盒需2-8℃避光保存,有效期6個月?

  安全規(guī)范?:

  禁止用嘴吸取試劑?

  避免接觸終止液/TMB,若接觸立即沖洗?

  質(zhì)量控制?:

  板內(nèi)變異系數(shù)<10%,板間<15%?

  空白OD值應(yīng)≤0.08?

  五、結(jié)果計算

  以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過曲線方程計算樣本濃度?。檢測范圍通常為0.25-8ppm?。

  (注:具體操作請以試劑盒內(nèi)附說明書為準(zhǔn),本說明綜合了不同廠家的通用流程?)

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