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　　大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒實驗使用說明書

　　以下是關(guān)于大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南：

　　BS-3458  大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒

　　一、實驗原理

　　采用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中T4水平。通過純化的大鼠T4抗體包被微孔板形成固相抗體，依次加入樣本、HRP標(biāo)記的T4抗體形成復(fù)合物，經(jīng)TMB顯色后測定450nm吸光度(OD值)，其顏色深淺與T4濃度呈正相關(guān)。

　　二、試劑盒組成

　　組分 48孔配置 96孔配置 保存條件

　　酶標(biāo)包被板 1×48孔 1×96孔 2-8℃

　　標(biāo)準(zhǔn)品(270μg/L) 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃

　　酶標(biāo)試劑 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃

　　顯色劑A/B液 各3ml×1瓶 各6ml×1瓶 2-8℃

　　終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃

　　濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃

　　三、樣本處理要求

　　血清?：室溫靜置2小時或4℃過夜后，1000×g離心20分鐘取上清，避免反復(fù)凍融

　　血漿?：EDTA/肝素抗凝采集，30分鐘內(nèi)2-8℃ 1000×g離心15分鐘

　　組織勻漿?：PBS沖洗后稱重剪碎，按重量體積比1:9加入生理鹽水勻漿，2000-3000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘取上清

　　四、操作步驟

　　加樣?：標(biāo)準(zhǔn)品/樣本加入對應(yīng)孔，建議做復(fù)孔

　　孵育?：37℃溫育30分鐘

　　洗滌?：甩干孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液靜置30秒后甩干，重復(fù)5次

　　加酶標(biāo)試劑?：每孔50μl，37℃避光孵育30分鐘

　　顯色?：依次加入顯色劑A/B各50μl，37℃避光反應(yīng)15分鐘

　　終止?：每孔加終止液50μl

　　檢測?：450nm波長測定OD值(建議5分鐘內(nèi)完成)

　　五、結(jié)果計算

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

　　樣本濃度=標(biāo)準(zhǔn)曲線對應(yīng)值×稀釋倍數(shù)

　　檢測范圍：0.703-45ng/ml，靈敏度0.422ng/ml

　　六、注意事項

　　試劑使用前需平衡至室溫(20-25℃)

　　不同批號試劑不得混用

　　濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶時需37℃溶解后使用

　　有效期6個月，2-8℃保存，避免反復(fù)凍融

　　七、技術(shù)支持

　　部分廠商提供免費代測服務(wù)及無效退換承諾，具體可咨詢供應(yīng)商。

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